WB实验的基本原理：
蛋白质免疫印迹（Western Blot）是一种以蛋白质转移到膜上为基础，利用抗体进行检测的方法。简单来说，就是通过特定基因的表达，检测相应蛋白质的存在与否及含量多少。这一过程多用于DNA和RNA相似的吸印方法，但操作技术略有不同。
与Southern或Northern杂交方法相似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”则通过标记的二抗实现。经过PAGE分离的蛋白质样品，被转移到固相载体（如硝酸纤维素薄膜）上，并以非共价键形式吸附蛋白质，保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。随后，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，最后通过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
WB实验准备：
需要准备的实验材料和试剂包括蛋白质样品、剂和试剂盒（如丙烯酰胺、SDS、Tris-HCl等），以及仪器和耗材（如电泳仪、电泳槽、离心机、离心管、硝酸纤维素膜等）。
WB实验步骤：
(一) 试剂准备：详见实验所需的各种试剂的配置方法。
(二) 蛋白样品制备：包括单层贴壁细胞总蛋白的提取、中总蛋白的提取以及加物处理的贴壁细胞总蛋白的提取。
(三) 蛋白含量的测定：制作标准曲线，检测样品蛋白含量。
(四) SDS-PAGE电泳：清洗玻璃板，灌胶与上样，进行电泳。
(五) 转膜：将凝胶上的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上。
(六) 免疫反应：将膜进行封闭，加入一抗和二抗，进行化学发光反应。
(七) 化学发光，显影，定影：将膜进行曝光，显影和定影处理。
(八) 凝胶图象分析：使用凝胶图象处理系统对条带进行识别和分析。